Oporność wielolekowa w Yersinia pestis zapośredniczona przez przenośny plazmid cd

Około procent utraciło część opornych determinantów, generując plazmidy pIP1202-1, -2, -3 i -4 (w Tabeli 1), które wykorzystano do oceny niekompatybilności plazmidów w eksperymentach przeprowadzanych przez odwrotną koniugację. Plazmid pIP1202-2 wykazywał silną niekompatybilność z pIP55-1, który należy do grupy Inc6-C.17. Hybrydyzację z sondą swoistą dla replikonów Inc6-C 18 wykryto tylko plazmidowym DNA ze szczepu rodzicielskiego 17/95 i E. coli. szczep, który nabył pIP1202 przez sprzęganie z 17/95, potwierdzając, że ten plazmid należy do grupy niekompatybilności Inc6-C (dane nie przedstawione).
Analiza plazmidowego DNA
Częściowe sekwencjonowanie produktu PCR o długości 864 bp, otrzymanego z użyciem oligodezoksynukleotydów specyficznych dla bla TEM-1, wykazało obecność cytozyny w pozycji 317 (numeracja według Sutcliffe19), co potwierdza, że oporność na ampicylinę była spowodowana obecnością genu dla TEM- penicylinazy. Sonda odpowiadająca catI hybrydyzowała z DNA pIP1202 i plazmidem nadawanym oporności E. coli DB10 na kwas fusydowy20, co wskazuje, że oporność na chloramfenikol była spowodowana wytwarzaniem acetylotransferazy chloramfenikolu typu I. Sondy wewnątrz genów aph (3 ) – I i aad (3 .) (9) hybrydyzowały z DNA pIP1202, potwierdzając, że oporność na kanamycynę wynika z syntezy fosfotransferazy 3 -aminoglikozydowej typu I i że oporność na streptomycynę spektynomycyna była spowodowana wytwarzaniem adenylotransferazy adenylowej 3.-9-aminoglikozydu (danych nie przedstawiono). Gen tet (D) wykryto przez hybrydyzację (Figura 1B), PCR i sekwencjonowanie 520 wewnętrznych par zasad. Amplifikacja PCR i sekwencjonowanie fragmentu o długości 488 bp wewnątrz determinanty sulI potwierdziły, że oporność na sulfonamid była spowodowana wytwarzaniem lekoopornej syntazy dihydropteranianowej. Gen sulI prawie zawsze znajduje się w konserwatywnych odcinkach integronów w elementach podobnych do Tn21, które są przenoszone przez duże plazmidy koniugujące.21 Użyliśmy specyficznych starterów do amplifikacji fragmentów wewnętrznych w genie integrazy i skróconej ORFIV z elementów podobnych do Tn21 z DNA pIP1202. metodą PCR, a dwa geny zostały znalezione w pozycji flanszowej (3 .) (9).
Dyskusja
Y. pestis jest uważany za powszechnie wrażliwy na antybiotyki zalecane i szeroko stosowany w profilaktyce i leczeniu dżumy.4 W ostatnich badaniach testowane izolaty były wrażliwe in vitro na wszystkie antybiotyki działające przeciwko bakteriom Gram-ujemnym, 6,7, z wyjątkiem tetracykliny we krwi. rzadkie przypadki.22
Wielolekooporna Y. pestis 17/95 została wyizolowana w 1995 r. W dystrykcie Ambalavao na Madagaskarze od pacjenta, który wykazywał objawy dżumy dymieniczej.5 Pomimo intensywnego nadzoru szczepów Y. pestis izolowanych w latach 1926-1995 na Madagaskarze, nie było wielu leków Odporność na oporne odkrycie. Szczep 17/95 był odporny nie tylko na wszystkie zalecane antybiotyki do leczenia (chloramfenikol, streptomycynę i tetracyklinę) i profilaktykę (sulfonamidy i tetracykliny) zarazy4, ale także na leki, które mogą stanowić alternatywę dla klasyczna terapia, taka jak ampicylina, kanamycyna, spektynomycyna i minocyklina
[podobne: alemtuzumab, Białkomocz, belimumab ]
[podobne: bańki chińskie allegro, bazofile poniżej normy, bioimpedancja elektryczna ]