Oporność wielolekowa w Yersinia pestis zapośredniczona przez przenośny plazmid

Yersinia pestis jest czynnikiem wywołującym dżumę, chorobą odzwierzęcą przenoszoną na ludzi przez ukąszenia pcheł i typowo charakteryzuje się pojawieniem się tkliwego węzła chłonnego, czyli dymienicy. Przenoszenie z człowieka na człowieka może nastąpić przez ugryzienie pcheł (dżuma dymienicza) lub krople oddechowe, powodując przytłaczającą infekcję zwaną dżumą płucną. Ostatnia epidemia dżumy rozpoczęła się w Hongkongu w 1894 roku i rozprzestrzeniła się na cały świat, tworząc wiele endemicznych ognisk. Antybiotyki i egzekwowanie środków zdrowia publicznego znacznie zmniejszyło zachorowalność i śmiertelność związaną z chorobą, ale nie pozwoliło na jej wyeliminowanie. W rzeczywistości dżumę uważa się obecnie za chorobę ponowną1 z co najmniej trzech powodów. Po pierwsze, wzrosła liczba przypadków zgłaszanych Światowej Organizacji Zdrowia.2 Po drugie, dżuma pojawiła się ponownie w 1994 r. W formie epidemii w krajach, w tym w Malawi, Mozambiku i Indiach, gdzie milczała od 15 do 30 lat. lat. Po trzecie, liczba ognisk stopniowo rośnie w niektórych krajach. Na przykład w Stanach Zjednoczonych liczba państw zgłaszających przypadki zarażenia ludzi wzrosła z 3 w latach 1950 do 13 w latach 90. 3
Streptomycyna, chloramfenikol i tetracyklina są stosowane w leczeniu dżumy, a tetracyklina i sulfonamidy są zalecane w profilaktyce.4 Klasycznie izolaty Y. pestis są jednakowo wrażliwe na antybiotyki działające przeciwko bakteriom Gram-ujemnym.5-7
Odnotowujemy wysoką odporność na wiele antybiotyków, w tym wszystkie leki zalecane w profilaktyce i leczeniu dżumy, w klinicznym izolacie Y. pestis. Geny odporności były przenoszone przez plazmid, który może być sprzężony z innymi izolatami Y. pestis. Raport ten powinien służyć jako ostrzeżenie przed ryzykiem rozprzestrzeniania się oporności u Y. pestis, gatunku wcześniej uważanego za powszechnie wrażliwy na antybiotyki.
Metody
Pacjent i szczepy
Tabela 1. Tabela 1. Właściwości badanych szczepów bakteryjnych. Właściwości użytych szczepów podano w tabeli 1. Y. pestis 17/95 biotyp orientalis wyizolowano w 1995 r. W dystrykcie Ambalavao na Madagaskarze od 16-letniego chłopca. 5 Pacjentka miała gorączkę, dreszcze i bóle mięśniowe. sugerujące malarię i leczone chininą. Trzy dni później pojawienie się prawego pachwinowego dymienicy z wysoką gorączką (temperatura, 41 ° C), majaczeniem i pokłonem doprowadziło do rozpoznania dżumy. Zapalono dymienicę, a pacjentowi podawano domięśniowe wstrzyknięcia streptomycyny dwa razy dziennie (2 g dziennie przez 4 dni) i doustny trimetoprim-sulfametoksazol (2 g dziennie przez 10 dni). Pacjent wyzdrowiał, ale miał ciężką astenię dłużej niż miesiąc.
Badania nad mediami i opornością
Stosowano bulion i agar z miażdżycą serca (Difco). Minimalne stężenia hamujące antybiotyków określono na agarze Muellera-Hintona (Sanofi Diagnostics Pasteur). Hodowle inkubowano przez 48 godzin w 28 ° C dla Y. pestis i przez 18 godzin w 37 ° C dla Escherichia coli. Acetylotransferaza chloramfenikolowa i enzymy modyfikujące aminoglikozydy badano w supernatantach (odwirowano przy 100 000 x g) po rozpadzie ultradźwiękowym.12,13 Mielenie na filtrach przeprowadzono w sposób opisany uprzednio.
Techniki Nucleic-Acid
Izolację plazmidowego DNA, cięcie fragmentów restrykcyjnych i oczyszczanie fragmentów DNA z agarozy typu VII (Sigma Chemical) przeprowadzono w sposób opisany w innym miejscu. 9 Oczyszczone fragmenty DNA do zastosowania jako sondy znakowano [.-32P] trifosforanem deoksycytydyny za pomocą nici tłumaczenie
[podobne: anastrozol, dekstran, suprasorb ]
[więcej w: babka płesznik dawkowanie, allegro dla gołębi, badanie trus ]