protezy zębowe nfz łódź

Mikroskopia konfokalna wykazała, że LSEC z przeszczepionymi GFP i CD31 dodatnimi różniły się od innych komórek sinusoidalnych (Supplemental Videos and 2). Oznaczało to, że przeszczepione LSEC fizjologicznie odtwarzały sinusoidalny przedział śródbłonkowy. Brak GFP w komórkach Kupffera wybarwionych F4 / 80 wskazał, że przeszczepione komórki nie były fagocytowane, co sugeruje brak ciągłego niszczenia komórek po transplantacji. Ryc. 3Integracja przeszczepionych LSECs w wątrobie. (A) TEM po barwieniu immunologicznym GFP pokazującym integrację przeszczepionych LSEC po tygodniu (strzałki) z charakterystycznym warstwowaniem wątrobowego śródbłonka sinusoidalnego (groty strzałek). Gwiazdka wskazuje naładowane lipidami komórki gwinciarskie w sąsiednim obszarze. (B. F) Analiza wychwytu DiI-Ac-LDL (czerwonego) w GFP-pozytywnych LSEC (zielony) wytwarzających żółty kolor w komórkach zawierających oba. Pokazano przeszczepione GFP-dodatnie LSECs u myszy FVB / N zawierających zielone, żółte lub czerwone domeny z powodu pobierania DiI-Ac-LDL w komórkach 3 miesiące (E) po przeszczepie komórek. (G. J) Połączone barwienie dla GFP (H) i CD31 (I) weryfikując przeszczepione komórki wyrażało oba markery (żółte). (K. N) Kosztujący F4 / 80 (L, czerwony) i GFP (M, zielony) wykazujący brak immunobarwienia F4 / 80 w przeszczepionych LSEC, co wskazuje na odróżnienie od komórek Kupffera. (G i K) Jądra barwione DAPI (niebieskie). Oryginalne powiększenie × 2 700 (A); × 200 (B); × 400 (C = F); × 630 (G. N). Paski skali: 5 m (A); 10 (m (GnN). Perturbacje indukowane przez MCT w LSEC. Wcześniej ustaliliśmy, że MCT natychmiast przerwał śródbłonek sinusoidalny wątroby, co można było wykazać na poziomie morfologicznym, a także w wyniku zaburzenia klirensu śródbłonkowych ligandów, np. Kwasu hialuronowego w surowicy, w ciągu 24. 48 godzin (17,18). Jeśli MCT zaburzyło wątrobę w krótkim okresie, a także w długim okresie, powinniśmy być w stanie wykazać odpowiednie zmiany w LSEC. Na przykład, zmiany w komórkach sygnałowych komórek regulujących przebudowę śródbłonka lub angiogenezę powinny nastąpić wkrótce po leczeniu MCT. Nasze badania na zwierzętach potraktowanych kilka godzin wcześniej MCT potwierdziły taką możliwość. Zaobserwowaliśmy szybki wzrost w wątrobie ekspresji MMP-9, receptora 2 VEGF i receptora chemokiny CXCR4, swoistego dla czynnika pochodzącego z komórek zrębowych (SDF-1), podczas gdy ekspresja VEGF lub SDF-1 w wątrobie pozostał niezmieniony (rysunek 4). Ponieważ MMP, CXCR4, VEGF i SDF-1 pośredniczą w procesach związanych z przebudową śródbłonka podczas przeszczepiania przeszczepionych komórek w wątrobie (24, 25), wyniki te były zgodne z aktywacją zdarzeń promujących wiązanie wszczepów u zwierząt traktowanych MCT. W tej sytuacji rekrutacja receptorów specyficznych dla komórek mogłaby pomóc w celowaniu przeszczepionych komórek do śródbłonka, podczas gdy degradacja matrycy i odtwarzanie MMP w matrycy będzie korzystne dla trwałej integracji przeszczepionych komórek w strukturze wątroby. Figura 4 Analiza RTR-PCR całkowitego RNA wątroby z myszy FVB / N leczonych MCT. RT-PCR dla kilku genów (MMP-9, CXCR4, SDF-1, VEGFR2 i VEGF) przeprowadzono na myszach uśmierconych w różnych czasach po MCT. W celu ekspresji genu analizowano RNA wątroby od 2 myszy na stan. Dane wykazały zwiększoną ekspresję MMP-9, CXCR4 i VEGFR2. Podobnie, MCT powinien mieć upośledzoną zdolność przetrwania i / lub proliferacji w natywnych EC po genotoksyczności, która jest znaną cechą alkaloidów pirolizydynowych (20). Aby przeanalizować zmiany w przeżyciu natywnych LSEC, przebadaliśmy myszy FVB / N 2. 4 tygodnie po MCT. Wybraliśmy te czasy, aby upewnić się, że ostre urazy po MCT zostaną rozwiązane i że EC nie zostanie poważnie zaburzone przez MCT. Żywotność świeżo izolowanych LSECs 2 tygodnie po MCT była upośledzona: 74%. 4% w porównaniu do 92%. 3% w LSECs od nieleczonych myszy kontrolnych, P <0,001 [podobne: neurologopedia lublin, artefakty ruchowe, allegro dla gołębi ]